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ELISA樣品稀釋技巧
發(fā)布時間： 2015-06-08 點(diǎn)擊次數(shù)： 990次在使用操作ELISA試劑盒時，檢測樣品的因素是實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)之一。根據(jù)上海恒遠(yuǎn)技術(shù)員的研究與發(fā)現(xiàn)，原來ELISA試劑盒的樣品稀釋還有這等講究……我們以血清樣品為例，酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng)，如果血清不稀釋，不可避免會產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng)，出現(xiàn)假陽性。
因此，國外檢測血清抗體的試劑盒，均規(guī)定將血清稀釋至適當(dāng)?shù)谋稊?shù)，以降低非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗(yàn)確定，ELISA試劑盒以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。但是，有些用戶未能嚴(yán)格按使用說明書操作，如某些產(chǎn)品應(yīng)取10μl樣品進(jìn)行稀釋，個別用戶取5μl甚至1μl樣品進(jìn)行稀釋，由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠，因此造成樣品稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)確，檢測結(jié)果出現(xiàn)問題。